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學做實驗的方法初步入門-迷你離心機技術文章
實驗方法:學做實驗兩者方法有所不同,大概分為兩種方法:向別人學習和自學。下面分別介紹一下吧
基本操作和基礎知識
在開始學做實驗的時候,有人指導。做實驗的內容,大概分為基本操作和具體實驗的操作。基本操作是具體實驗的基礎,例如:怎樣量取容積,怎樣測量和調節PH值,怎樣清洗實驗室器皿,無菌操作技術,怎樣使用pipette,怎樣配置溶液,怎樣autoclave(高壓蒸汽滅菌)等。學做實驗的時候,應該先學zui基本的操作,再學具體的實驗。這些基本操作具有至關重要的作用,它直接決定了實驗的成功率。
可以推薦幾本基本關于實驗操作的書。*本書是《分子生物學實驗室工作手冊》(英文名At the bench: a laboratory navigator)。這本書是生物醫學研究生的入門書籍,建議精讀三遍以上。本書中譯本大約300多頁,相對于將要介紹的其它幾本書籍要薄很多。它介紹了怎樣在實驗室與他人相處,怎樣建立實驗室,怎樣寫實驗記錄,實驗室的基本操作如試劑的配置、儲藏和處理,無菌技術,細胞培養,離心,測PH值,電泳,顯微鏡的使用等??偠灾?,本書基本上囊括了生物醫學實驗室日常遇到的問題和所有的基本操作,是生物醫學研究生的入門書籍。
第二本書是《分子克隆》(英文名Molecular cloning: a laboratory manual),本書被譽為分子生物學的圣經,幾乎每一個生物實驗室都有一本。本書介紹了分子生物學常用實驗技術的基本原理和許多protocol。目前已經出版到第三版。*版出版于 1982年,第二版出版于1989年,第三版出版于2001年。書中提供的protocol很經典,但是有些目前已經改進了。這本書很厚,第三版英文版有2000多頁,所以幾乎不可能也沒有必要精讀所有章節,只要閱讀自己正在做的實驗的相關內容就可以了。
《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》這本書從怎樣量取體積,稱取重量,測量PH值,測量濃度等zui基本的操作說起,講到配置溶液,細胞培養,PCR,樣本的準備,層析,電泳,印跡實驗,顯微鏡,酶促反應(PCR等)。這本書共有737頁,講的是每天做實驗都要遇到的問題,詳盡系統卻又簡明易懂。對于希望學好做實驗的人而言,本書必須仔細閱讀,對于希望成為實驗高手的人而言,本書更應該精讀。Current Protocol是Wiley出版社出版的一個實驗室手冊叢書,是生物醫學實驗經典叢書之一,目前有16本,包括:Neuroscience, Molecular biology, Microbiology, Immunology, Toxicology, Cell biology等。
以上三本書各有特點。《At the bench: a laboratory navigator》為科普性質,是對實驗室基礎技術的粗略介紹,《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》是對實驗室基礎技術的詳細介紹,而《Molecular Cloning》則是對具體實驗的詳細介紹。按照“柿子先撿軟的捏”的原則,建議先通讀《At the bench: a laboratory navigator》,再通讀《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》1,2,3,5,9章及正在學習的具體實驗的相關章節,加上閱讀《Molecular Cloning》正在學習的具體實驗的相關章節。通讀的時候,標出重點及自己的知識盲點,以后多復習重點和知識盲點幾遍直至了然于胸。
怎樣向別人學做實驗
如果有人教做實驗,學習效率會高很多。無論是向老師還是向師兄師姐學習,都需要注意別人的時間是寶貴的,所以盡可能一兩次學會。因此,在學習之前,先問清楚需要學習的實驗內容,自己先通過閱讀書籍,查閱網絡資料對該實驗的原理和基本操作有一個大概的了解。好記性不如爛筆頭,在學習的時候,要帶上紙筆做記錄。遇到不懂的地方,不要因為覺得不禮貌而將疑問存于心中,而應該詢問清楚。實驗的精髓不是一份簡單的Protocol,而是實驗的“心法”:關鍵步驟,注意事項,常見問題和解決方法。做任何一個實驗,必須清楚關鍵步驟、注意事項、常見問題和解決方法。要清楚一個試劑的作用是什么,加多或者少加會有什么后果;一個步驟的目的是什么,時間太長或者太短會怎樣等。在學習的時候,如果沒有教這些“心法”,自己應該主動請教,并記錄下來。
一開始學做實驗的時候,分三步走:老師示范,自己做老師看,自己獨立做。認真的態度常常使別人樂于教你,如果自己無所謂,則別人會覺得教你是在浪費時間。在開始學做一個實驗的時候,及時、詳細的實驗記錄是非常必要的,如果實驗失敗,這些記錄是分析失敗原因的重要依據。做完實驗之后,要總結經驗教訓,記錄下來,并定期復習這些經驗教訓。總之,學做實驗,遵循的步驟是:1。 預習。2。觀摩,記錄。3。自己操作。4。總結和復習。*次實驗就成功,常常不是一件好事,因為可能僅僅是運氣好。多次失敗后的成功才是掌握了實驗的可靠指標。好的實驗室常常有成熟的Protocol,不好的實驗室,Protocol可能并不完善,需要自己摸索和調整。
怎樣自學做實驗
不是每一個實驗都有人教,需要自學的情況很常見。自學做實驗,必須在掌握了實驗的基本操作的基礎上進行。自學實驗,關鍵是要找到可行的protocol,并清楚實驗原理,關鍵步驟,常見問題和解決方法。 我一般采取的程序是:首先用搜索引擎檢索實驗原理,常見問題,注意事項等。把網上許多文章拷貝下來,仔細閱讀,找出重點,總結成簡化版。然后,找一個好的protocol。Protocol可以從檢索,從書籍中找到,從別人的文獻中找,或者從生物公司的上找。這些方法下面分別介紹。找到不同的protocol進行比較,分析為什么不同。通過比較,可以加深對實驗的理解。
如果系里或者認識的人有正在學習的實驗的專家,向專家請教,可以節約不少時間。有時候,一個小小的細節問題就可以浪費許多時間。
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